石斛，又叫做林兰、千年润以及吊兰花，它的原植物属于兰科植物。无论是它的干茎还是鲜茎都可以作为药材使用。而且，石斛在安徽、广西、云南以及海南等等的地区都有种植。石斛原植物主要分为铁皮石斛、重唇石斛、聚石斛以及广东石斛等等。那么，铁皮石斛组培的技术怎么样的?下面就由小编带你去了解一下铁皮石斛组培的技术吧。
1、胚培养(种子培养)
取人工授粉的铁皮石斛果实，用75%的乙醇表面消毒，30s后再用0.1%溶液消毒8min，无菌水冲洗4~5次。在无菌操作下，把果实切成0.1mm见方的小块，接种到培养基上，每瓶3~5块。研究结果表明，N6培养基对种子萌发和生长最好，蔗糖浓度2%最佳，NAA浓度0.2~0.5mg/L最适合胚的萌发和生长，种子培养中加入椰乳对胚萌发和萌发后的初期生长起促进作用，而香蕉汁对继代培养中石斛的生根和壮苗起促进作用，生根和壮苗培养中不加入NAA，只用N6+10%香蕉汁，苗长得更粗壮。培养温度25~28℃，光照强度1600~2000lx，每日10~12h。种子萌发后，转管3~4次，当幼苗长出4~5片真叶并具有3~4条1~2cm长的根时，可将试管苗进行炼苗后移栽。
在实验中尚发现，石斛原球茎的增殖与胚龄相关，不同胚龄培养，其萌发率不同：胚龄45天以下，萌发率极低，萌发时间长;60天胚龄的胚具34个细胞，萌发率为6%;90天胚龄的胚细胞为74个，萌发率为87%，120天胚龄的细胞数为90个，萌发率95%以上。实验表明，组织培养的最适胚龄以种子成熟时较好，随着胚龄增长，其胚细胞愈多，萌发率越高。原球茎增殖分化的最适培养基为改良N6+NAA0.2mg/L+2%蔗糖。种子萌发成苗后需及时将小苗转移到合适的培养基中进行生根、壮苗培养。有报道，铁皮石斛试管茁壮苗阶段的适宜培养基为B6(或1/2MS)+10%香蕉水提物+NAA2.0mg/L+2%蔗糖。生根壮苗培养基为改良N6+10%香蕉+2%蔗糖，苗长得更粗壮。将萌芽石斛继代培养于N6+10%香蕉汁生根壮苗培养基中，苗长得更粗壮。
2、茎尖培养
取铁皮石斛当年萌发的嫩茎尖，用10%次氯酸钠消毒10min，无菌水冲洗4~5次后接种到培养基上。研究结果表明，培养温度为25~28℃，光照度1600~2000lx，每日光照10~12h。在MS+NAA0.2mg/LBA0.5mg/L培养基中培养30天左右，外植体则可诱导出大小不一的白色颗粒状愈伤组织，再过20天形成不定芽。将愈伤组织和不定芽切割开，再接种到MS+NAA0.2mg/LBA0.5mg/L中，愈伤组织会增殖并产生不定芽，再将不定芽移到N6+10%香蕉汁中培养30天左右，则会生根长成植株。
3、幼嫩茎段培养
剪取铁皮石斛幼嫩茎段，按常规表面灭菌，切成2.0cm左右的切段，每一切段应至少保留1个节，将其接入芽增殖培养基MS+NAA0.1~0.5mg/LBA0.5~2.0mg/L。(蔗糖浓度3.0%，PH5.4~5.8，下各培养基均同)中培养。培养条件：培养温度(25±2)℃，连续光照培养，光照强度1500lx。培养30~50天后，可在节间处长出1~2个新芽。将新芽切下，再接入芽增殖培养基中继代培养，经过30天培养，在切口处长出4~6个芽，形成丛生芽簇。将丛生芽切割后，在芽增殖培养基中继续增殖培养，则可获得大量丛生芽。将上述丛生芽切割成单苗，转入壮苗培养基MS(无激素)中培养，40天后，芽可发育成高3.0cm以上并具2~3片叶的健壮无根苗。再将经过壮苗培养的无根苗，转接到生根培养基1/2MS+IBA0.1mg/L中培养40~60天，在苗基部便可长出多条肉质、绿色气生根，形成完整植株。
尚有报道，取铁皮石斛茎，去叶、洗净、表面灭菌后，在无菌条件下切成约5mm长的小段，每段必具一个茎节，接种于1/2MS或努森培养基内，置(26±1)℃光照条件下培养，约2周，腋芽长出，约1个月则可形成完整植株。
4、炼苗与移栽
当试管苗有4~5片叶展开，并具有3~4条1~2cm长的根时，即可揭开瓶盖，在室内炼苗1周后，将再生植株移植于细土与牛粪(1：2)的栽培基质中，盖上薄膜，保持湿度90%以上，基质以湿润、不积水为宜，置通风阴凉处，成活率可达60%。或以碎砖4份，碎木炭1份，珍珠岩和蕨根适量组合为移栽基质，其既能透气，又能排水保水。经研究表明，铁皮石斛试管苗的出瓶移栽，在4~6月温度较高、湿度较大时的成活率最高。移栽后的小苗放在阴湿且通风地方，一周内不浇水，以防湿度过大而烂根。以后随植株生长而加强管理，则可确保铁皮石斛试管苗的成活。
好了，以上就是小编对铁皮石斛组培技术的详细解析啦，仅供参考。可能很多朋友都不了解铁皮石斛，甚至都知道铁皮石斛是什么东西，有什么样的用处，更不用说知道铁皮石斛组培技术了。而如果刚好想要学习铁皮石斛组培技术的朋友，可以参考上面的技术方法进行铁皮石斛的组培。在正式进行铁皮石斛组培之前，最好把具体的技术内容了解清楚之后再进行组培，以保证组培的成功。
